Að rjúfa inntökuhindrun（4）

Uppgötvun og afleiðugreining á hringlaga peptíðinu PTG-200
Uppgötvun PTG-200

Árið 2016 birti Protagonist einkaleyfi (WO2016011208) fyrir fjölpeptíðhemli til inntöku sem miðar að IL-23R, sem innihélt nokkrar línulegar og hringlaga peptíðraðir sem geta bundist IL-23R. Athyglisvert er að raðirnar sem sýndar eru í töflu 3A í þessu einkaleyfi líkjast mjög mannvirkjum sem áður voru fengin með MDL í gegnum fögur birtingu. Listaðar línulegu peptíðraðirnar innihalda fyrst og fremst kjarnabygginguna -WQDYW- (eins og sýnt er á myndinni hér að neðan). Meðal þeirra náði öflugasta sameindinni (SEQ ID NO.4) IL-23R hamlandi styrk upp á 4,1 µM, með uppbyggingu hennar mynduð með asetýleringu N-enda MDL's Peptide 23.15.
Þess má geta að MDL og Protagonist sömdu einu sinni um samstarf um IL-23R peptíðið árið 2014, þar sem MDL deildi rannsóknarupplýsingum sínum. Árið 2015 skrifuðu aðilar undir trúnaðarsamning en viðræðunum var slitið í október sama ár. Síðari lagaleg skjöl leiddu í ljós að MDL höfðaði mál gegn Protagonist fyrir héraðsdómi Bandaríkjanna, vegna einkaleyfisbrots af hálfu PTG-200, sem snerti einkaleyfi US 8946150 (MDL) og US 9624268 (Protagonist). Árið 2018 var kröfu MDL um einkaleyfisbrot vísað frá vegna þess að Protagonist notaði þessi peptíð til að þróa FDA-samþykkt lyf fyrir sjálfsofnæmissjúkdóma, sem var verndað samkvæmt reglunni um örugga höfn.

Aftur að áherslum þessarar greinar, Protagonist hélt - WQDYW kjarnabyggingunni sem MDL lagði til í síðari sameindabreytingum, en tók upp mismunandi hönnun í hringrásarstefnunni. Þeir settu Cys inn í kjarnaröðina til að mynda varðveitta byggingu - CXX-WQCYW - (eins og - CQTWQCYW -), og leiddu hundruð peptíða í kringum þessa byggingu, sem jók virkni upp í nanómólar gildi (eins og sýnt er á skýringarmyndinni hér að neðan). Að auki hefur Protagonist einnig reynt ýmsar hringrásaraðferðir, þar á meðal að koma á þíóetertengi á milli tveggja Cys-staða, nota olefin metathesis hvarf (RCM) og innleiða hringrásaraðferðir amíðtengja. Hins vegar benda tilraunaniðurstöður til þess að peptíð sem eru hringlaga með tvísúlfíð- eða þíóetertengi hafi almennt betri virkni en peptíð sem eru hringlaga með RCM eða amíðtengjum.

Lyfjahvarfagögn PTG-200 (efnasambands C) eru birt í einkaleyfinu: eftir inntöku hjá rottum í 20 mg/kg skammti dreifist efnasambandið aðallega í meltingarvegi, með mjög lágri almennri útsetningu. Meðal þeirra er AUC slímhúð smáþarma 355 μg · klst./g og ristilslímhúð er 77 μg · klst./g. Hins vegar er AUC í plasma aðeins 0,3 μg · klst./mL, með endurheimtarhlutfall 40% í saur. Þetta efnasamband sýnir góðan stöðugleika í ýmsum meltingarvegi og afoxandi umhverfi: Helmingunartími þess er lengri en 24 klukkustundir í herma þarmavökva (SIF), herma magavökva (SGF) og þarmavökva úr mönnum, og það hefur einnig helmingunartíma sem er meira en 2 klukkustundir í afoxunarefninu DTT. Niðurstöður SPR tilraunarinnar sýndu að það binst ekki IL-12R 1 eingöngu, en getur bundist yfirborði IL-23R og IL-12R 1/IL-23R samhliða tjáð, með sterka sækni og KD gildi upp á 2,42 nM og 2,56 nM, í sömu röð.

Afleiða PTG-200

Árið 2017 gaf Protagonist út annað einkaleyfi sitt fyrir IL-23R peptíðhemla (WO2017011820). Þetta einkaleyfi stækkar beinagrind fyrsta einkaleyfisins um 227 afleiddar raðir (SEQ ID NO.1030-1256) og kynnir byggingareiningar á hringlaga peptíðinu sem geta lengt helmingunartímann in vivo (eins og sýnt er á eftirfarandi mynd). Lyfjahvarfarannsóknir hafa sýnt að eftir inntöku 10mg/kg peptíðs NO.1185 hjá rottum er styrkurinn í plasma mun lægri en í smáþörmum og ristilsýnum og endurheimtshraðinn í saur nær 20% eftir 24 klst. Öryggismatið sýndi að peptíð NO.1185 hafði ekki hamlandi áhrif á 44 markhópa, þar á meðal G prótein tengda viðtaka, flutningsefni og jónagöng við 10 µM.

Í kjölfarið gaf Protagonist út nokkur afleidd einkaleyfi byggð á PTG-200 eða Peptíð NO.1185 mannvirkjum, sem hámarkaði virkni og stöðugleika enn frekar með byggingarafleiðum á mismunandi leifarstöðum. Upplýsingar um tengdar breytingar er að finna í einkaleyfum WO2018136646, WO2020014646, WO2021007433 og WO2021146458. Að auki hefur Protagonist einnig sótt um einkaleyfi (WO2018022937) sem nær yfir hringlaga peptíð IL-23R hemla sem inniheldur 34 amínósýrur, sem ekki verður fjallað frekar um í þessari grein.