Frá AEEA einliða til tvíliða

Drug to Antibody Ratio (DAR) er lykilgæðaeiginleiki mótefnasamsettra lyfja (ADC) sem hefur bein áhrif á verkun og eituráhrif. Hin fullkomna DAR er venjulega 2-4, en mörg skilvirk hleðsla eins og MMAE og DM1 hafa sterka vatnsfælni. Þegar stutt er keðja eða stakur PEG tengir, leiðir DAR yfir 4 til hraðari mótefnasamsöfnunar og úthreinsunar. Innleiðing AEEA-AEEA veitir skilvirka lausn á þessu vandamáli.
Í samanburði við einn AEEA tengilið,AEEA-AEEAtvöfaldar PEG keðjulengdina og hefur sterkari vatnssækni. Hver dimereining leggur til 4 etertengi og 2 amíðtengi, sem geta bundið fleiri vatnssameindir og myndað þéttara vökvalag. Þegar mörg vatnsfælin lyf eru tengd mótefnayfirborðinu í gegnum AEEA-AEEA getur vökvunarlagið á áhrifaríkan hátt verndað vatnsfælin milliverkanir lyfja og komið í veg fyrir mótefnasamsöfnun. Tilraunagögn sýna að ADCs smíðaðir með AEEA-AEEA viðhalda kvoðastöðugleika (samsöfnunarhraði<5%) even when DAR reaches 6-8, while the control using single AEEA shows significant precipitation when DAR>4.
DAR reglugerðarstefnan vísar til fortengingar AEEA-AEEA við lyf í staðstýrðri tengingartækni og bregðast síðan við cysteini á mótefninu. Með því að stilla mólhlutfall tengilyfs og mótefnis (venjulega 3:1 til 10:1) er hægt að stjórna DAR-gildinu nákvæmlega. Til dæmis getur 2-falt umframmagn skilað DAR2 vöru, 4-falt umframmagn getur skilað DAR4 og 8falt umframmagn getur náð DAR6-8. HIC-HPLC eða massagreining getur nákvæmlega ákvarðað dreifingu DAR. Fyrir æxlisábendingar sem krefjast mikils álags, eins og brjóstakrabbamein með lága HER2 tjáningu og smáfrumukrabbameins í lungum, gerir AEEA-AEEA mikla DAR mögulegt og bætir verulega æxlisdrepandi áhrif. Forklínískar rannsóknir hafa sýnt að ADC DAR6 eykur æxlishömlunartíðni um um 40% samanborið við ADC DAR4 við sama skammt, án þess að auka eiturverkanir verulega.